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Selección de tamaño de la DNA de GDSPure de la construcción de la biblioteca de NGS y limpieza Magbeads
Datos del producto:
| Lugar de origen: | China |
| Nombre de la marca: | GDSBio |
| Certificación: | ISO9001, ISO13485 |
| Número de modelo: | NC1011, NC1012, NC1013 |
Pago y Envío Términos:
| Cantidad de orden mínima: | 1 caja |
|---|---|
| Detalles de empaquetado: | el pequeño paquete o el bulto distribuye u OEM |
| Tiempo de entrega: | 8 días del trabajo |
| Condiciones de pago: | L/C, D/A, D/P, T/T, Western Union, MoneyGram |
| Capacidad de la fuente: | 10000 cajas/cajas por día |
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Información detallada |
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| Común: | sí | Gato. No.: | NC1011, NC1012, NC1013 |
|---|---|---|---|
| Especificación: | 5ml, 60ml, 450ml | Uso: | Selección de tamaño y limpieza |
| Blanco: | DNA | Logo Printing: | Con Logo Printing |
| Paquete del transporte: | Embalaje | Vida útil: | 2 años |
| Condiciones de almacenamiento: | Tienda en 2-8°C | ||
| Alta luz: | Construcción de la biblioteca del CE NGS,Limpieza Magbeads de la construcción de la biblioteca de NGS |
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Descripción de producto
Selección Magbeads de la DNA de GDSPure
Gato. No: NC1011, NC1012, NC1013
Componentes
| Componente | NC1011 | NC1012 | NC1013 |
| Selección Magbeads de la DNA de GDSPure | 5 ml | 60 ml | 450 ml |
Almacenamiento
Este reactivo se debe guardar en 2-8°C. No congele. La vida útil es 2 años si es cerrada.
Descripción
Gotas superparamagnéticas de alto rendimiento del uso de Magbeads de la selección de la DNA de GDSPure y ratio excelente del almacenador intermediario para purificar y para seleccionar exactamente fragmentos de la DNA a partir del punto de ebullición el 150 al punto de ebullición 1000 o aún más grande. Exceso de los nucleótidos, las sales, las enzimas y otras impurezas introducidos en la operación de la construcción de la biblioteca de la DNA serán quitados después de proceso que se lava simple, para obtener los fragmentos purificados, que se pueden utilizar directamente en usos rio abajo tales como secuencia, hibridación, polimerización en cadena y digestión de la enzima. La selección Magbeads de la DNA de GDSPure se puede utilizar por formatos manuales y automáticos.
Uso
Selección de tamaño y limpieza para la secuencia de la siguiente generación (NGS), Sanger que ordena, qPCR, ddPCR y microarrays, etc.
Trabajo preparatorio antes del experimento
1. Solución que se lava: el 80% fresco (V/V) solución del etanol
2. Solución del eluyente: agua o TE Buffer nucleasa-libre
3. Vórtice
4. Estante magnético
5. Para asegurar la exactitud de la gama de selección, el volumen de muestra de la DNA debe ser μL del ≥ 50
6. Antes del experimento, saque las gotas magnéticas del refrigerador y caliéntelas a la temperatura ambiente por más de 20 minutos antes de usar
Protocolos
Selección de tamaño de fragmentos de la DNA más grandes que un tamaño especificado (selección de un sólo lado)
1. Prepare la muestra de la DNA de 50 μL en un tubo de centrífuga apropiado.
2. Añada cierto volumen de selección nueva Magbeads de la DNA de GDSPure según el 1r ratio de la adición de la gota en el cuadro 1 a la muestra. Suavemente soplo con una pipeta durante 10 veces (o vórtice para 30 s). Incube las muestras para el minuto 5 en la temperatura ambiente.
Por ejemplo, para seleccionar todo el punto de ebullición más grande de 250 de los fragmentos en la muestra, añada la suspensión magnética de la gota de 40 μL (0.80X).
3. Coloque el tubo en un estante magnético apropiado para separar las gotas del sobrenadante. Cuando la solución está clara, quitar y desechar cuidadosamente el sobrenadante con una pipeta (no deseche las gotas).
4. Añada el μl 200 del etanol recién preparado del 80% al tubo mientras que en el estante magnético. Incube en la temperatura ambiente para 30 s, y entonces quitar y desechar cuidadosamente el sobrenadante (no perturbe las gotas).
5. Repita el paso 4 una vez para un total de dos lavados.
Nota: Esté seguro de quitar todo el líquido visible después del segundo Washington.
6. El aire seca las gotas hasta que la superficie de las gotas magnéticas no tenga ningún lustre obvio mientras que el tubo está en el estante magnético con la tapa abierta.
Nota: Haga no overdry las gotas, ésta puede dar lugar a una recuperación más baja de la DNA. Cuando las gotas comienzan a agrietarse, son demasiado secas.
7. Quite el tubo del estante magnético. Enjuague la blanco de la DNA de las gotas en el agua o TE Buffer nucleasa-libre del μl 30-40. Mézclese bien midiendo con una pipeta arriba y abajo por lo menos de 10 veces o en un mezclador del vórtice para 30 el S. incuba para el minuto 3-5 en la temperatura ambiente.
8. Coloque el tubo en el estante magnético. Después del minuto 5 (o cuando la solución está clara), transfiera el sobrenadante a un nuevo tubo. Se termina la selección, y la DNA seleccionada se puede utilizar para los experimentos subsiguientes o almacenar en -20°C durante mucho tiempo.
Selección de tamaño de fragmentos de la DNA en los intervalos específicos del tamaño (selección de doble cara)
1. Prepare la muestra de la DNA de 50 μL en un tubo de centrífuga apropiado y etiquétela como A.
2. Añada cierto volumen de selección nueva Magbeads de la DNA de GDSPure según el 1r ratio de la adición de la gota en el cuadro 1 al soplo de A. Gently del tubo con una pipeta durante 10 veces (o vórtice para 30 s). Incube las muestras para el minuto 5 en la temperatura ambiente.
Por ejemplo, para seleccionar el punto de ebullición cerca de 250 de los fragmentos en la muestra, añada la suspensión magnética de la gota de 40 μL (0.80X).
- Coloque el tubo A en un estante magnético apropiado para separar las gotas del sobrenadante. Cuando la solución está clara, quite cuidadosamente el sobrenadante a un nuevo tubo y etiquételo como gotas de B. Discard.
4. Añada cierto volumen de suspensión magnética de la gota según el 2do ratio de la adición de la gota en el cuadro 1 al soplo de B. Gently del tubo con una pipeta durante 10 veces (o vórtice para 30 s). Incube las muestras para el minuto 5 en la temperatura ambiente.
Por ejemplo, para seleccionar el punto de ebullición cerca de 250 de los fragmentos en la muestra, añada la suspensión magnética de la gota de 10 μL (0.20X).
5. Coloque el tubo B en el estante magnético. Cuando la solución está clara, quitar y desechar cuidadosamente el sobrenadante.
6. Añada el μl 200 del etanol recién preparado del 80% al tubo B mientras que en el estante magnético. Incube en la temperatura ambiente para 30 s, y entonces quitar y desechar cuidadosamente el sobrenadante (no perturbe las gotas).
7. Repita el paso 6 una vez para un total de dos lavados.
Nota: Esté seguro de quitar todo el líquido visible después del segundo Washington.
8. El aire seca las gotas hasta que la superficie de las gotas magnéticas no tenga ningún lustre obvio mientras que el tubo está en el estante magnético con la tapa abierta.
Nota: Haga no overdry las gotas, ésta puede dar lugar a una recuperación más baja de la DNA. Cuando las gotas comienzan a agrietarse, son demasiado secas.
9. Quite el tubo B del estante magnético. Enjuague la blanco de la DNA de las gotas en el agua o TE Buffer nucleasa-libre del μl 30-40. Mézclese bien midiendo con una pipeta arriba y abajo por lo menos de 10 veces o en un mezclador del vórtice para 30 el S. incuba para el minuto 3-5 en la temperatura ambiente.
10. Coloque el tubo B en el estante magnético. Después del minuto 5 (o cuando la solución está clara), transfiera el sobrenadante a un nuevo tubo. Se termina la selección, y la DNA seleccionada se puede utilizar para los experimentos subsiguientes o almacenar en -20°C durante mucho tiempo.
Cuadro 1: Condiciones recomendadas para la selección de tamaño
| Tamaño aproximado | punto de ebullición 200 | punto de ebullición 250 | punto de ebullición 300 | punto de ebullición 400 | punto de ebullición 500 | punto de ebullición 600 | punto de ebullición 700 | |
| Ratio de la gota | 1ra adición de la gota | 0.90X | 0.80X | 0.70X | 0.60X | 0.55X | 0.50X | 0.45X |
| 2da adición de la gota | 0.50X | 0.20X | 0.20X | 0.20X | 0.15X | 0.15X | 0.15X | |
Notas
1. Lea por favor la instrucción cuidadosamente antes de usar y actúe según las instrucciones.
2. El etanol en el tubo de centrífuga se debe quitar lo más lejos posible antes de la elución para asegurar eficacia de la elución.
3. El volumen del eluyente se puede ajustar según los requisitos experimentales, pero no menos el μL que 20.
4. Las gotas magnéticas deben evitar operaciones de la centrifugación, de la congelación y otro. Antes de usar, la suspensión de las gotas puede ser completamente mezclada por vórtice y otros métodos, y colocado por más de 20 minutos para calentarse a la temperatura ambiente.
5. Evite el líquido que cuelga en la cubierta del tubo durante vórtice y que mide con una pipeta la operación para reducir la pérdida de la DNA.
GDSBio es una compañía de alta tecnología centrada en el desarrollo, la producción y el márketing de los productos de las ciencias de la vida de la calidad. La compañía tiene una línea de productos completa, con tecnología de la polimerización en cadena como la base, centrándose en la polimerización en cadena ordinaria, construcción de la biblioteca cuantitativa fluorescente de la polimerización en cadena, de NGS, electroforesis ácida nucléica y otras tecnologías de la biología molecular, y ha desarrollado los reactivo moleculares de la investigación científica, las materias primas de diagnóstico ines vitro moleculares, los reactivo de la extracción ácida nucléica y de la detección y otros productos.
